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[发明专利]具有L-脯氨酸外排功能的蛋白及其应用-CN202110045175.4在审
发明人：孙际宾;刘娇;郑平;刘莫识;王钰;周文娟;孙冠男 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2021-01-13 - 公布日： 2022-07-19 - 主分类号： C07K14/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种具有L‑脯氨酸外排功能的蛋白及其应用。利用蛋白ThrE生产L‑脯氨酸或羟基脯氨酸的方法，是通过在产L‑脯氨酸的菌株中增强具有L‑脯氨酸外排功能的多肽的活性生产L‑脯氨酸。或者，使产L‑脯氨酸的宿主细胞中具有L‑脯氨酸外排功能的多肽的活性减弱并使脯氨酸羟化酶的活性增强生产羟基脯氨酸。
具有脯氨酸外排功能蛋白及其应用

[发明专利]一种同时制备D-脯氨酸和L-1-吡咯啉-5-羧酸的生物法-CN202010235113.5有效
发明人：夏仕文;张凡凡;谢永芳 -专利权人：重庆邮电大学
申请日： 2020-03-30 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12P13/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种同时制备D‑脯氨酸和L‑1‑吡咯啉‑5‑羧酸的生物法。该方法以解木糖赖氨酸芽孢杆菌XX‑40为发酵菌株，DL‑脯氨酸为发酵前体。该菌株首先利用DL‑脯氨酸中的部分L‑脯氨酸生长并诱导产生L‑脯氨酸脱氢酶，剩余L‑脯氨酸在L‑脯氨酸脱氢酶作用下转化为L‑1‑吡咯啉‑5‑羧酸，D‑脯氨酸完全保留。发酵液中的细胞不经分离，直接或分批添加DL‑脯氨酸，利用胞内L‑脯氨酸脱氢酶将其中的L‑脯氨酸转化为L‑1‑吡咯啉‑5‑羧酸。采用本发明中的发酵/转化级联方式，发酵液中D‑脯氨酸浓度达到20g/L，ee99％，发酵液中L‑1‑吡咯啉‑5‑羧酸浓度达到16g/L，产率达到40％。本发明提供的方法工艺简单，环境友好，适合D‑脯氨酸和L‑1‑吡咯啉‑5‑羧酸的工业化生产。
一种同时制备脯氨酸吡咯羧酸生物

[发明专利]一种在生物合成法生产顺式-3-羟基-L-脯氨酸的系统中有效提高脯氨酸转化率的方法-CN201610032734.7在审
发明人：张震宇;黄建华;王晓姣;姚动邦;魏照辉 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-01-19 - 公布日： 2016-05-04 - 主分类号： C12N15/71 文献下载
摘要：公开了一种在生物合成法生产顺式-3-羟基-L-脯氨酸的系统中有效提高脯氨酸转化率的方法。其中，生物合成法生产顺式-3-羟基-L-脯氨酸的系统是指，在生物细胞内利用脯氨酸-4-羟化酶在α-酮戊二酸及亚铁离子存在的情况下，将游离的L-脯氨酸转化为顺式-3-羟基-L-脯氨酸的生产方法。提高脯氨酸转化率的方法为：打断生物细胞内脯氨酸的降解途径。通过使用这种方法，顺式-3-羟基-L-脯氨酸的转化率达到了100％。
一种生物成法生产顺式羟基脯氨酸系统有效提高转化方法

[发明专利]一种利用重组嗜乙酸棒杆菌发酵生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的方法-CN201610035787.4在审
发明人：张震宇;王晓姣;姚动邦;魏照辉;黄建华 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-01-19 - 公布日： 2016-05-25 - 主分类号： C12P13/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用重组嗜乙酸棒杆菌发酵生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的方法。该重组嗜乙酸棒杆菌携带的重组质粒具有催化脯氨酸生成反式-4-羟脯氨酸的脯氨酸羟化酶基因(P4H)。在重组嗜乙酸棒杆菌细胞内，脯氨酸-4-羟化酶在α-酮戊二酸以及亚铁离子存在的情况下，可以将游离的L-脯氨酸转化为反式-4-羟基-L-脯氨酸。本发明还公开了所述在嗜乙酸棒杆菌反式-4-羟基-L-脯氨酸生产中的应用。
一种利用重组乙酸杆菌发酵生产反式羟基脯氨酸方法

[发明专利]一种通过敲除其他代谢途径进而提高反式-4-羟脯氨酸产量的生物合成方法-CN201610035648.1在审
发明人：张震宇;王晓姣;姚动邦;黄建华;魏照辉 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-01-19 - 公布日： 2016-05-04 - 主分类号： C12P13/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种有效提高羟脯氨酸产量的生物合成方法。其中，生物合成法生产羟基-L-脯氨酸的系统是指，在生物细胞内生物体在α-酮戊二酸及亚铁离子存在的情况下利用脯氨酸羟化酶，将游离的L-脯氨酸转化为反式-4-羟基-L-脯氨酸的生产方法。提高羟脯氨酸产量的方法为：切断生物细胞内与L-脯氨酸竞争前体底物谷氨酸的其他代谢途径。其中，其他代谢途径是指，精氨酸代谢途径。通过使用这种方法，反式-4-羟基-L-脯氨酸的产量达到921mg/L。
一种通过其他代谢途径进而提高反式羟脯氨酸产量生物合成方法

[发明专利]一种高产L-脯氨酸的重组菌及其构建方法与应用-CN201811526205.8在审
发明人：张伟国;徐建中;王颖妤;张峰 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-12-13 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产L‑脯氨酸的重组菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明通过在棒杆菌属的L‑脯氨酸生产菌中L‑脯氨酸合成途径关键酶TA编码基因ilvE启动子后插入终止子以及过表达脯氨酸生物合成的关键基因proB，在棒杆菌属的L‑脯氨酸生产菌中构建了高效的L‑脯氨酸合成途径，获得了高产L‑脯氨酸且降低副产物含量的重组菌株。
脯氨酸构建棒杆菌属合成途径生产菌重组菌高产基因工程技术编码基因关键基因生物合成重组菌株副产物关键酶启动子终止子应用

[发明专利]一种L-羟脯氨酸的半抗原、人工抗原、单克隆抗体及其制备方法与应用-CN201210315692.X有效
发明人：刘聚祥;王建平;王丽莉;张会彩;刘静 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2012-08-25 - 公布日： 2012-12-19 - 主分类号： C07D207/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种L-羟脯氨酸的半抗原、人工抗原和单克隆抗体及其制备方法与应用。L-羟脯氨酸的半抗原含有L-羟脯氨酸的分子结构，以该半抗原与载体蛋白的连接物作为免疫原，可以产生针对L-羟脯氨酸的抗体。因此，本发明提供的L-羟脯氨酸半抗原可以制备L-羟脯氨酸的特异性抗体，用于L-羟脯氨酸的免疫分析和筛选，提高检测效率，降低检测成本。
一种羟脯氨酸半抗原人工抗原单克隆抗体及其制备方法应用

[发明专利]反式-4-羟基-L-脯氨酸的生产菌株及其构建方法和应用-CN201811574728.X有效
发明人：孙际宾;刘娇;王兴初;周文娟;郑平;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2018-12-21 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸生产菌株的构建方法，所述方法包括增强所述反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸生产菌株中铵转运蛋白的活性。本发明还公开了利用所述方法构建的反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸生产菌株和利用所述菌株制备反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的方法。本发明构建的反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸生产菌株的反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸产量显著提高，并且为构建反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸生产菌株开拓了新的思路。
反式羟基脯氨酸生产菌株及其构建方法应用

[发明专利]一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的方法-CN201710661945.1有效
发明人：孙际宾;刘娇;郑平;王兴初;周文娟;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2017-08-04 - 公布日： 2019-03-05 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种生产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的方法。具体地，本发明提供了一种多肽在生产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸或以反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸为前体的下游产物中的用途。本发明还提供了生产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸的方法，所述方法包括培养表达所述多肽的菌株，从而得到反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸。本发明还提供了一种反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸生产菌株，以及所述反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸生产菌株的构建方法。利用本发明的方法可高效、低成本地产生反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸。
脯氨酸反式羟基反式- 4 -羟基- L -脯氨酸生产菌株多肽生产下游产物低成本构建菌株前体

[发明专利]一种药用脯氨酸的制备方法-CN201810708257.0在审
发明人：宁健飞;蔡立明;陈晓双 -专利权人：无锡晶海氨基酸股份有限公司
申请日： 2018-07-02 - 公布日： 2018-10-12 - 主分类号： C07D207/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种药用脯氨酸的制备方法，属于分离提取技术领域。本发明的方法为将脯氨酸发酵液先经强酸性阳离子树脂进行吸附，再依次经弱碱性阴离子树脂和弱酸性阳离子树脂进行过滤以得到一水脯氨酸，然后将一水脯氨酸经乙醇脱水得到无水药用脯氨酸成品；运用本发明的方法制得的药用脯氨酸为无水脯氨酸
脯氨酸无水制备强酸性阳离子树脂弱碱性阴离子树脂弱酸性阳离子树脂发酵液先分离提取乙醇脱水比旋度可控制透光度晶型吸附过滤

[发明专利]新型脯氨酸4-羟化酶及其应用-CN201810885744.4有效
发明人：孙际宾;赵晶;刘超;周文娟;郑平;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2018-08-06 - 公布日： 2022-09-20 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种改造脯氨酸4‑羟化酶的方法，该方法通过在待改造脯氨酸4‑羟化酶的特定位点之间的区段进行整体替换，和/或在特定位点进行氨基酸突变能显著提高所得脯氨酸4‑羟化酶的活性和热稳定性，从而得到稳定性和活性优异的脯氨酸本发明的脯氨酸4‑羟化酶可以应用于生产反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸或以反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸为前体的下游产物。
新型脯氨酸羟化酶及其应用

[发明专利]反式-L-羟脯氨酸的生产菌株及其构建方法和应用-CN201910074717.3有效
发明人：孙际宾;刘娇;王兴初;郭轩;周文娟;郑平;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2019-01-25 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种反式‑L‑羟脯氨酸生产菌株的构建方法，所述方法包括增强所述反式‑L‑羟脯氨酸生产菌株中SEQ ID NO:1、2或3所示核苷酸序列编码的转运蛋白的活性。本发明还公开了利用所述方法构建的反式‑L‑羟脯氨酸生产菌株和利用所述菌株制备反式‑L‑羟脯氨酸的方法。本发明构建的反式‑L‑羟脯氨酸生产菌株的反式‑L‑羟脯氨酸产量显著提高，并且为构建反式‑L‑羟脯氨酸生产菌株开拓了新的思路。
反式羟脯氨酸生产菌株及其构建方法应用

[发明专利]肽、拟肽及其衍生物、它们的生产方法以及它们用于制备治疗和/或预防活性的药物组合物的用途-CN200980117411.6无效
发明人： P·佩策尔鲍尔;S·雷因格鲁贝尔;W·帕斯特纳;R·亨宁 -专利权人：菲布雷克斯医疗研究及开发有限责任公司
申请日： 2009-04-21 - 公布日： 2011-05-18 - 主分类号： C07K14/75 文献下载
摘要：这样的氨基酸包括但不限于：L-脯氨酸、D-脯氨酸、L-羟脯氨酸、D-羟脯氨酸、L-(O-苄基)-羟脯氨酸、D-(O-苄基)-羟脯氨酸、L-(O-叔丁基)-羟脯氨酸、4-(O-2-萘基)-羟脯氨酸、4-(O-2-萘基-甲基)-羟脯氨酸、4-(O-苯基)-羟脯氨酸、4-(4-苯基-苄基)-脯氨酸、顺式-3-苯基-脯氨酸、顺式-4-苯基-脯氨酸、反式-4-苯基-脯氨酸、顺式-5-苯基-脯氨酸、反式-5-苯基-脯氨酸、4-苄基-脯氨酸、4-溴苄基-脯氨酸、4-环己基-脯氨酸、4-氟-脯氨酸、L-四氢异喹啉-2-甲酸(L-Tic)、八氢-吲哚-2-甲酸(Oic)的所有非对映异构体和1-氮杂-双环[3，3，0]
及其衍生物它们生产方法以及用于制备治疗预防活性药物组合用途

[发明专利]高产L-脯氨酸的谷氨酸棒杆菌以及高产L-脯氨酸的方法-CN202110952846.5有效
发明人：郑平;刘娇;孙际宾;刘莫识;周文娟;孙冠男;王钰;石拓;郭轩;马延和 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2021-08-19 - 公布日： 2022-07-12 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种生产L‑脯氨酸的谷氨酸棒杆菌，以及利用该菌株生产L‑脯氨酸的方法。本发明构建的生产L‑脯氨酸的谷氨酸棒杆菌，其中脯氨酸脱氢酶/吡咯‑5‑羧酸脱氢酶PutA失活，谷氨酸激酶ProB、谷氨酸‑5‑半醛脱氢酶ProA、吡咯‑5‑羧酸脱氢酶ProC、丙酮酸羧化酶Pyc、甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶GapN、L‑脯氨酸外排蛋白ThrE或SerE活性增强，L‑谷氨酸外排蛋白MscCG失活，得到的菌株的L‑脯氨酸产量、转化率和生产强度较出发菌株显著提升，可降低L‑脯氨酸的生产成本。
高产脯氨酸谷氨酸杆菌以及方法

[发明专利]一种顺式-D-羟脯氨酸的制备方法-CN202110102897.9有效
发明人：吴法浩;李钢;高仰哲;陈红玉;王志航 -专利权人：南京红杉生物科技有限公司
申请日： 2021-01-26 - 公布日： 2022-04-29 - 主分类号： C07D207/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种顺式‑D‑羟脯氨酸的制备方法，属于化学合成技术领域。该方法包括以下步骤：将反式‑L‑羟脯氨酸进行消旋，第一次降温重结晶，固液分离，得到第一顺式‑D‑羟脯氨酸粗品和第一母液；将第一母液与新的反式‑L‑羟脯氨酸混合并进行消旋，第二次降温重结晶，固液分离，得到第二顺式‑D‑羟脯氨酸粗品和第二母液；将第二母液与新的反式‑L‑羟脯氨酸混合循环制备新的顺式‑D‑羟脯氨酸粗品和新的母液至少6次；将所有顺式‑D‑羟脯氨酸粗品均溶解于甲醇及乙酸乙酯的混合溶液中，随后降温重结晶，得到顺式‑D‑羟脯氨酸。该方法能有效制备得到纯度和收率均较高的顺式‑D‑羟脯氨酸，且该方法步骤简单，利于工业化生产。
一种顺式羟脯氨酸制备方法

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